96孔酶(mei)標(biao)板的類型(xing)與(yu)操(cao)作(zuo)使(shi)用(yong)註意事項(xiang)!

　　通(tong)常使(shi)用(yong)96孔微孔板。盡(jin)管(guan)不同制(zhi)造商(shang)生產的微孔板相似，但(dan)在某(mou)些小細節(例(li)如(ru)某(mou)些結構(gou))上(shang)會有(you)所(suo)不同，這主要(yao)是(shi)由於(yu)不同的酶(mei)標(biao)儀(yi)的合作(zuo)。

　　96孔酶(mei)標(biao)板的類型(xing)：

　　它(ta)分(fen)為可(ke)分(fen)離和不可(ke)分(fen)離。對於不可(ke)拆(chai)卸，即將整(zheng)個板上(shang)的板條(tiao)連(lian)接(jie)在壹(yi)起(qi)，則可(ke)拆(chai)卸的是(shi)將板上(shang)的板條(tiao)分(fen)開，並(bing)且分(fen)開的板條(tiao)有(you)12個孔和8個孔。常用(yong)的是(shi)可(ke)拆(chai)卸的微孔板。如(ru)果您以前(qian)購買(mai)過這(zhe)些板，則可(ke)以購買(mai)壹些微(wei)板。盡(jin)管(guan)不同制(zhi)造商(shang)生產的微孔板總(zong)體上看起(qi)來相似，但(dan)某(mou)些小細節也(ye)會有(you)所(suo)不同，例如(ru)結構(gou)。這(zhe)主要(yao)是(shi)由於(yu)使(shi)用(yong)了(le)不同的酶(mei)標(biao)儀(yi)。因(yin)此，在選(xuan)擇(ze)購買(mai)微孔板時(shi)，還應(ying)考(kao)慮微孔板閱(yue)讀(du)器(qi)的外觀(guan)。但(dan)是(shi)，它(ta)們(men)通(tong)常是(shi)經過(guo)修(xiu)改的，只有(you)個別(bie)的會有(you)所(suo)不同。因為酶(mei)板的材料通(tong)常是(shi)聚(ju)苯(ben)乙烯(PS)，並(bing)且聚(ju)苯(ben)乙烯的化學(xue)穩定性很(hen)差(cha)，所(suo)以它(ta)可(ke)以被(bei)多(duo)種(zhong)有(you)機(ji)溶(rong)劑(ji)(例(li)如(ru)芳(fang)烴，鹵(lu)代(dai)烴(ting)等)溶(rong)解，並(bing)且會被腐蝕通(tong)過強(qiang)酸和強(qiang)堿。它(ta)不耐油(you)脂(zhi)，並(bing)且在紫(zi)外(wai)線照(zhao)射後(hou)很(hen)容(rong)易(yi)變色(se)，因此在使(shi)用(yong)過程中(zhong)必(bi)須(xu)註意這(zhe)些。

　　96孔酶(mei)標(biao)板的操作(zuo)使(shi)用(yong)註意事項(xiang):

　　1.添(tian)加樣(yang)品：將樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液添(tian)加到塗(tu)層板上(shang)，用(yong)PBS或生理鹽(yan)水(shui)按1:20的比例(li)稀(xi)釋待(dai)測(ce)血(xue)清，然(ran)後(hou)向(xiang)微孔板的反(fan)應(ying)孔中添(tian)加10ul。

　　2.添(tian)加對照(zhao)：添(tian)加3孔陰(yin)性對照(zhao)，1孔陽性對照(zhao)和100ul對照(zhao)血(xue)清。

　　3.孵(fu)育：搖動反(fan)應(ying)板以使(shi)樣(yang)品充(chong)分(fen)混(hun)合，然(ran)後(hou)將其置(zhi)於(yu)37°C的培養(yang)箱(xiang)或水(shui)浴中20分(fen)鐘(zhong)。

　　4.洗(xi)滌板：用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)將15ml洗(xi)滌溶(rong)液(ye)稀釋至300ml。用(yong)手(shou)洗(xi)滌時(shi)，應(ying)倒出反(fan)應(ying)板孔中的內容(rong)物，並(bing)用(yong)洗(xi)滌液(ye)充(chong)滿(man)孔中的位置，然(ran)後(hou)靜(jing)置(zhi)30秒以使(shi)其(qi)劇烈(lie)搖動。重復(fu)此操(cao)作(zuo)5次，然(ran)後(hou)拍(pai)幹。機洗(xi)需(xu)要(yao)執行(xing)5次。可(ke)以將200ul洗(xi)滌溶(rong)液(ye)註入每(mei)個孔中或(huo)將其充(chong)滿(man)，然(ran)後(hou)放(fang)置(zhi)30秒鐘(zhong)並(bing)吸(xi)幹。

　　5.添(tian)加酶(mei)標(biao)記(ji)的工(gong)作(zuo)溶(rong)液(ye)：向(xiang)每個孔中添(tian)加100ul酶(mei)標(biao)記(ji)的工(gong)作(zuo)溶(rong)液(ye)，放(fang)置(zhi)在37°C的培養(yang)箱(xiang)中，反(fan)應(ying)20分(fen)鐘(zhong)後洗(xi)板5次。洗(xi)滌板的操作(zuo)與(yu)上(shang)述步(bu)驟(zhou)4相同(tong)。

　　6.這(zhe)是(shi)反(fan)應(ying)的後壹(yi)步(bu)，是(shi)顯色(se)和反(fan)應(ying)終(zhong)止(zhi)：將50ul底物添(tian)加到反(fan)應(ying)孔中，並(bing)在37°C的黑暗(an)中顯色(se)10分(fen)鐘(zhong)。停止每個孔的溶(rong)液(ye)並(bing)混(hun)合以終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)。

　　微(wei)孔板的使用(yong)應(ying)在無(wu)菌(jun)條(tiao)件(jian)下(xia)進(jin)行(xing)。在使(shi)用(yong)微孔板之(zhi)前(qian)和之(zhi)後(hou)，請仔細對其進(jin)行(xing)消(xiao)毒(du)和清潔，但(dan)是(shi)應(ying)註(zhu)意，某(mou)些微(wei)孔板在滅(mie)菌(jun)之(zhi)前(qian)需(xu)要(yao)仔細閱(yue)讀(du)說(shuo)明(ming)，以查(zha)看它(ta)們(men)是(shi)否(fou)可(ke)以在高(gao)溫(wen)下進(jin)行(xing)滅(mie)菌(jun)。

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