羊谷(gu)胱(guang)甘(gan)肽(tai)過(guo)氧化物(wu)酶(GSH-Px)ELISA
試(shi)劑(ji)盒(he)用(yong)於(yu)測定血清(qing),血漿及相(xiang)關(guan)液體(ti)等樣(yang)本(ben)。例(li)如適合(he)檢測包括血清(qing)、血漿、尿(niao)液、胸腹水(shui)、灌洗液、腦脊液、細(xi)胞培(pei)養(yang)上清(qing)、組(zu)織勻(yun)漿等(deng)標(biao)本(ben)。檢測種屬(shu):人(ren)、大(da)小(xiao)鼠、豚(tun)鼠、兔(tu)子(zi)、豬(zhu)、犬(quan)、牛(niu)羊(yang)、雞(ji)鴨、猴(hou)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)等(deng)種(zhong)屬(shu)。
樣(yang)本(ben)處理(li)及要(yao)求(qiu):
1.血清(qing):室(shi)溫血液自(zi)然(ran)凝(ning)固(gu)10-20分(fen)鐘(zhong),離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing),保(bao)存(cun)過(guo)程中如出現沈澱(dian),應再次(ci)離(li)心。
2.血漿:應根(gen)據標(biao)本(ben)的要(yao)求(qiu)選擇(ze)EDTA或(huo)檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉作為抗凝劑,混(hun)合(he)10-20分(fen)鐘(zhong)後(hou),離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing),保(bao)存(cun)過(guo)程中如有沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應該再次(ci)離(li)心。
3.尿(niao)液:用(yong)無(wu)菌管(guan)收集(ji),離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing),保(bao)存(cun)過(guo)程中如有沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應再次(ci)離(li)心。胸腹水(shui)、腦脊液參(can)照(zhao)實行。
4.細胞(bao)培(pei)養(yang)上清(qing):檢測分(fen)泌(mi)性(xing)的成(cheng)份(fen)時(shi),用(yong)無(wu)菌管(guan)收集(ji)。離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。檢測細胞(bao)內的成(cheng)份(fen)時(shi),用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋細胞(bao)懸(xuan)液,細(xi)胞濃度(du)達(da)到100萬/ml左右。通(tong)過(guo)反(fan)復凍(dong)融,以使細胞(bao)破壞並放出細胞內成(cheng)份(fen)。離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。保(bao)存(cun)過(guo)程中如有沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應再次(ci)離(li)心。
5.組(zu)織標(biao)本(ben):切割標(biao)本(ben)後,稱(cheng)取重(zhong)量。加(jia)入(ru)壹定量(liang)的PBS,PH7.4。用(yong)液氮(dan)迅速(su)冷(leng)凍(dong)保(bao)存(cun)備用(yong)。標(biao)本(ben)融化後(hou)仍然(ran)保(bao)持(chi)2-8℃的溫度(du)。加(jia)入(ru)壹定量(liang)的PBS(PH7.4),用(yong)手工或(huo)勻(yun)漿器(qi)將標(biao)本(ben)勻(yun)漿充(chong)分(fen)。離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。分(fen)裝(zhuang)後(hou)壹份(fen)待(dai)檢測,其余冷(leng)凍(dong)備用(yong)。
6.標(biao)本(ben)采集(ji)後盡(jin)早(zao)進行提(ti)取(qu),提(ti)取(qu)按相關文(wen)獻進行,提(ti)取(qu)後應盡(jin)快進行實驗。若(ruo)不能(neng)馬(ma)上進行試(shi)驗,可(ke)將標(biao)本(ben)放於-20℃保(bao)存(cun),但應避(bi)免(mian)反(fan)復凍(dong)融.
7.不能(neng)檢測含NaN3的樣(yang)品,因NaN3抑(yi)制辣(la)根(gen)過(guo)氧化物(wu)酶的(HRP)活性。