影(ying)響PCR實(shi)驗(yan)的(de)因(yin)素之(zhi)壹、PCR耗(hao)材(cai)

　　在(zai)PCR實(shi)驗(yan)中(zhong)，影(ying)響擴(kuo)增(zeng)效果(guo)的因(yin)素有很多(duo)。我們(men)能(neng)想(xiang)到(dao)的有dNTP的(de)質量(liang)與濃度、模板(ban)核(he)酸的(de)量(liang)與純化(hua)程(cheng)度、引(yin)物(wu)的(de)設計、DNA聚(ju)合酶(mei)的濃度、擴(kuo)增長(chang)度等問題。

　　實(shi)際上，使(shi)用的耗(hao)材(cai)也(ye)可(ke)能(neng)會影(ying)響實(shi)驗(yan)結果，而(er)這往(wang)往(wang)被我們(men)所忽(hu)略。因(yin)此(ci)在(zai)選(xuan)擇實(shi)驗(yan)耗(hao)材(cai)前，我們(men)還(hai)需(xu)要了解BUNSEN本生PCR耗(hao)材(cai)相(xiang)關的特(te)性和(he)術(shu)語。

　　如何選(xuan)擇合(he)適(shi)的PCR耗(hao)材(cai)，本生簡(jian)述(shu)：

　　1、原材(cai)料

　　PCR/qPCR耗(hao)材(cai)壹般都(dou)是(shi)聚(ju)丙烯(xi)(PP)材(cai)質。

　　因(yin)其為(wei)生物(wu)學(xue)惰性材(cai)料，表(biao)面不易(yi)粘(zhan)附(fu)生物(wu)分(fen)子，且(qie)有著(zhe)良(liang)好的(de)化(hua)學耐(nai)性，及(ji)溫(wen)度耐(nai)受性 (可(ke)121℃高壓(ya)滅(mie)菌(jun)，也可(ke)以承(cheng)受熱循(xun)環過(guo)程中(zhong)的(de)溫(wen)度變化)。這些材(cai)料通常會與試劑或(huo)者樣品直(zhi)接接觸(chu)，因(yin)而在(zai)生(sheng)產(chan)制(zhi)備(bei)過(guo)程中(zhong)需(xu)要選(xuan)用高質量(liang)的材(cai)料和(he)良(liang)好的(de)加(jia)工工(gong)藝(yi)。

　　2、選(xuan)擇合(he)適(shi)的容積

　　PCR管(guan)的(de)體積規(gui)格大(da)多(duo)數(shu)都(dou)可(ke)以滿足PCR反(fan)應(ying)要求。但是(shi)在(zai)滿(man)足實(shi)驗(yan)要求的基礎上，優先推薦選(xuan)用低容管(guan)。因(yin)為(wei)低容反(fan)應(ying)管(guan)/板(ban)有著(zhe)較小(xiao)的(de)上(shang)方空間，可(ke)提(ti)高(gao)熱傳導(dao)率並(bing)降(jiang)低(di)蒸(zheng)發。而(er)且(qie)在(zai)加(jia)樣時，需(xu)要避免(mian)加樣過(guo)量(liang)或過(guo)少(shao)。過(guo)量(liang)會導致熱傳(chuan)導率(lv)下(xia)降(jiang)，溢(yi)出(chu)及交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)，而(er)加(jia)樣過(guo)少(shao)可(ke)能(neng)會造成樣品蒸(zheng)發損(sun)失(shi)。

　　大家(jia)可(ke)依據具體的實(shi)驗(yan)要求選(xuan)用合適(shi)的產(chan)品：

　　3、PCR管(guan)管(guan)蓋(gai)的(de)選(xuan)擇

　　平(ping)蓋(gai)與(yu)凸蓋(gai)各(ge)有優(you)勢(shi)：

　　平(ping)蓋(gai)可(ke)為(wei)qPCR提(ti)供(gong)精確(que)的熒(ying)光信(xin)號(hao)傳(chuan)遞(di);便(bian)於(yu)書(shu)寫(xie)標(biao)記;合蓋(gai)容易(yi)，密封(feng)性好，易(yi)於操(cao)作。

　　凸蓋(gai)與(yu)PCR儀熱蓋(gai)接觸(chu)，減(jian)少(shao)壓(ya)力(li)引起的反(fan)應(ying)管(guan)變形(xing)，更好的(de)防(fang)止液(ye)體蒸(zheng)發。但(dan)會影(ying)響熒(ying)光信(xin)號(hao)傳(chuan)遞(di)，無(wu)法(fa)應(ying)用於qPCR實(shi)驗(yan)。

　　4、96孔(kong)板(ban)裙邊的(de)選(xuan)擇

　　無(wu)裙邊板(ban)：可(ke)適(shi)用於大(da)多(duo)數(shu)的PCR儀或qPCR儀，但不適(shi)用於自動(dong)化、應(ying)用。移液(ye)過(guo)程中(zhong)穩(wen)定性不高(gao)，需(xu)要配合板(ban)托使(shi)用。

　　半裙邊板(ban)：可(ke)適(shi)配標(biao)簽或(huo)應(ying)用條碼，適(shi)合自動(dong)化應(ying)用，且(qie)有著(zhe)較好的(de)移(yi)液穩(wen)定性。

　　全(quan)裙邊板(ban)：非(fei)常(chang)適(shi)用於自動(dong)化實(shi)驗(yan)應(ying)用，也可(ke)適(shi)配標(biao)簽及(ji)應(ying)用條碼。機(ji)械(xie)強度較好，可(ke)適(shi)用於凸出模塊的PCR儀，且(qie)移液過(guo)程中(zhong)穩(wen)定性高(gao)。

　　5、根據實(shi)驗(yan)選(xuan)擇耗(hao)材(cai)

　　根據檢(jian)測方法(fa)的不同(tong)，耗(hao)材(cai)的(de)選(xuan)擇也(ye)不同(tong)。

　　PCR實(shi)驗(yan)分(fen)為(wei)普通PCR法(fa)和熒(ying)光定量(liang)PCR法(fa)。普通PCR法(fa)壹般是(shi)終點PCR跑(pao)膠(jiao)法(fa)測定，所以所用耗(hao)材(cai)的(de)導熱性和(he)密封(feng)性和(he)實(shi)驗(yan)結果有著(zhe)密不可(ke)分的關系;而(er)熒(ying)光定量(liang)PCR是(shi)實(shi)時檢測(ce)熒(ying)光信(xin)號(hao)，除(chu)了(le)導(dao)熱(re)性和(he)密封(feng)性外(wai)，對(dui)透(tou)光性和(he)避光性也(ye)有所(suo)要求。

　　簡而言(yan)之(zhi)，做(zuo)熒(ying)光定量(liang)PCR的耗(hao)材(cai)也(ye)可(ke)以做(zuo)普通PCR，反之(zhi)則不行(xing)。

　　導熱性

　　導(dao)熱(re)性越(yue)好越(yue)均壹，PCR的(de)速(su)度就(jiu)越(yue)快，準確(que)度也(ye)越(yue)高(gao)。

　　密封(feng)性

　　密封(feng)性越(yue)好，產(chan)物(wu)的(de)揮(hui)發越(yue)少(shao)，得(de)到(dao)的產(chan)物(wu)就(jiu)越(yue)多(duo)，同(tong)時(shi)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)的產(chan)生(sheng)也(ye)越(yue)少(shao)，對(dui)於(yu)下(xia)壹輪(lun)實(shi)驗(yan)的(de)汙(wu)染(ran)也(ye)就(jiu)越(yue)少(shao)，也(ye)就(jiu)意味著(zhe)假陽(yang)性的(de)產(chan)生(sheng)率(lv)越(yue)低(di)。

　　避光性

　　這(zhe)是(shi)針(zhen)對(dui)熒(ying)光定量(liang)而言的(de)，如果我們(men)在(zai)整(zheng)個(ge)實(shi)驗(yan)過(guo)程中(zhong)沒註意避光，帶(dai)有熒(ying)光的試劑過(guo)度被消耗(hao)，那(na)直(zhi)接就(jiu)會影(ying)響我們(men)實(shi)驗(yan)的(de)擴增效率(lv)，導致產(chan)生(sheng)不準確(que)的結果。

　　透(tou)光性

　　這(zhe)也(ye)是(shi)對(dui)於(yu)熒(ying)光定量(liang)而言，我們(men)知道(dao)它是(shi)壹種實(shi)時定量(liang)的方式，那(na)麽(me)耗(hao)材(cai)本身(shen)的透光性就(jiu)直(zhi)接關系到(dao)我們(men)檢測到(dao)的熒(ying)光信(xin)號(hao)多(duo)少(shao)。如果選(xuan)擇耗(hao)材(cai)透(tou)光性良(liang)好，需(xu)要檢測到(dao)的信(xin)號(hao)就(jiu)會變得(de)微(wei)弱(ruo)，那(na)就(jiu)會造成我們(men)對(dui)結果的(de)誤判(pan)。所以(yi)對(dui)於(yu)熒(ying)光定量(liang)而言，白(bai)色PCR板(ban)效果(guo)優於透明PCR板(ban)。

　　PCR耗(hao)材(cai) 本生壹直(zhi)視(shi)質量(liang)控(kong)制(zhi)為(wei)企(qi)業(ye)的(de)生(sheng)命(ming)，追(zhui)求(qiu)企(qi)業(ye)競(jing)爭(zheng)力(li)的不斷(duan)提(ti)升(sheng)。公司在(zai)經(jing)營(ying)中(zhong)始(shi)終秉承(cheng)：遵紀守法(fa)，嚴於律(lv)己(ji)，寬(kuan)仁(ren)以(yi)待(dai)，敢於承(cheng)擔的企(qi)業(ye)精(jing)神(shen)作為(wei)標(biao)準，以(yi)過(guo)硬的(de)質量(liang)和優良(liang)的(de)服(fu)務來維護和(he)拓(tuo)展市場(chang)，較大(da)限度的(de)滿足客(ke)戶的需求。與(yu)客(ke)戶的共贏，是(shi)我們(men)的發展目(mu)標(biao)。本生!您(nin)信(xin)任的合(he)作(zuo)夥伴。我們(men)願與您真(zhen)誠(cheng)合(he)作，共創美(mei)好的(de)未來(lai)。