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知(zhi)識分(fen)享(xiang):間接ELISA方(fang)法(fa)的試驗(yan)步驟、結果判定方(fang)法(fa)
間接ELISA方(fang)法(fa)的試驗(yan)步驟主(zhu)要(yao)包(bao)括抗(kang)原(yuan)包(bao)被、洗滌(di)封閉(bi)、加待(dai)檢(jian)血清(同(tong)時設立陰(yin)陽性(xing)對(dui)照(zhao))、反應壹(yi)定時(shi)間、洗滌(di)、加酶(mei)標(biao)二(er)抗(kang)、反應壹(yi)定時(shi)間、洗滌(di)、加底物溶(rong)液、反應壹(yi)定時(shi)間、終(zhong)止反應,最後判(pan)定結果。
抗(kang)原(yuan)包(bao)被:將(jiang)抗(kang)原(yuan)在(zai)不(bu)損(sun)壞(huai)其免疫(yi)活(huo)性的條(tiao)件下預先(xian)結合(he)到某種(zhong)固相(xiang)載(zai)體(ti)表(biao)面。
洗滌(di)封閉(bi):清(qing)洗並封閉(bi)固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)上(shang)的非特異性結合(he)位點(dian),以(yi)減(jian)少非(fei)特異性結合(he)。
加待(dai)檢(jian)血清:加入(ru)待(dai)檢測的血清樣本。
反應壹(yi)定時(shi)間:讓(rang)抗(kang)原(yuan)與抗(kang)體在(zai)固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)上(shang)充(chong)分(fen)反應。
洗滌(di):去除(chu)未結合(he)的物質(zhi)。
加酶(mei)標(biao)二(er)抗(kang):加入(ru)酶(mei)標(biao)記(ji)的二抗(kang),與已結合(he)的抗(kang)原(yuan)-抗(kang)體復(fu)合(he)物反應。
再(zai)加反應壹(yi)定時(shi)間:讓(rang)酶(mei)標(biao)二(er)抗(kang)與抗(kang)原(yuan)-抗(kang)體復(fu)合(he)物充分(fen)結合(he)。
再次(ci)洗滌(di):去除(chu)未結合(he)的酶(mei)標(biao)二(er)抗(kang)。
加底物溶(rong)液:加入(ru)酶(mei)作用的底物溶(rong)液。
反應壹(yi)定時(shi)間:底物在(zai)酶(mei)的作用下發生化(hua)學反應,產生可(ke)檢(jian)測的信號(hao)。
終止反應:通(tong)過(guo)加入(ru)終(zhong)止液來(lai)停(ting)止化學反應。
判(pan)定(ding)結果:通過肉眼(yan)觀察或使用儀器(qi)測定反應產物的量,從而判定結果。結果可以(yi)表(biao)示為陽性(xing)與陰(yin)性、P/N比值、終點(dian)滴度(du)或(huo)通過(guo)標(biao)準(zhun)曲線進行定(ding)量(liang)測定。
間接ELISA方(fang)法(fa)的結果判定可(ke)以(yi)通(tong)過多(duo)種(zhong)方(fang)式(shi)進行,包(bao)括:
肉眼(yan)觀察或儀器(qi)測定:根(gen)據(ju)顏(yan)色(se)變化(hua)或信號(hao)強(qiang)度(du)判斷結果。
P/N比值:陽性對(dui)照(zhao)(P)與陰(yin)性對(dui)照(zhao)(N)的比值,用於評(ping)估(gu)實驗(yan)的可靠(kao)性。
終(zhong)點(dian)滴度(du):表(biao)示血清樣本中抗(kang)體的最高(gao)稀(xi)釋(shi)度(du),仍(reng)能與抗(kang)原(yuan)發(fa)生反應。
標(biao)準(zhun)曲線定量(liang)測定:通(tong)過(guo)繪(hui)制(zhi)標(biao)準(zhun)品濃度(du)與信號(hao)強(qiang)度(du)的標(biao)準(zhun)曲線,對(dui)未知(zhi)樣本進行定(ding)量(liang)分(fen)析。
這(zhe)種(zhong)方(fang)法(fa)利(li)用了(le)抗(kang)原(yuan)與抗(kang)體的特異性結合(he)以(yi)及酶(mei)的高(gao)效催(cui)化(hua)作用,通過(guo)底物的顏色(se)變化(hua)或信號(hao)強(qiang)度(du)來定量(liang)或定性檢測樣本中的特定成分,具有高(gao)靈(ling)敏(min)度(du)和特異性,廣泛應用於生物學和醫學研(yan)究(jiu)中
本生壹(yi)直視(shi)質(zhi)量控(kong)制(zhi)為企業(ye)的生命,追(zhui)求(qiu)企業競(jing)爭(zheng)力(li)的不斷提(ti)升。公司在(zai)經(jing)營中始終(zhong)秉(bing)承(cheng):遵(zun)紀守(shou)法,嚴(yan)於律(lv)己,寬(kuan)仁(ren)以(yi)待(dai),敢於(yu)承(cheng)擔(dan)的企業精(jing)神作為標(biao)準(zhun),以(yi)過(guo)硬(ying)的質(zhi)量和優良的服(fu)務(wu)來維(wei)護(hu)和拓(tuo)展(zhan)市場,較大(da)限度(du)的滿足(zu)客(ke)戶(hu)的需求(qiu)。與客(ke)戶(hu)的共贏(ying),是我(wo)們的發展目(mu)標(biao)。本生!您信任的合(he)作夥伴。我(wo)們願與您真誠合(he)作,共創美(mei)好的未來。
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