elisa實驗(yan)中幾種常見問(wen)題(ti)及造成(cheng)問(wen)題的主(zhu)要原因

　　ELISA實驗(yan)操(cao)作中易(yi)出現(xian)多(duo)種問(wen)題(ti)，以下(xia)為(wei)問(wen)題及其主(zhu)要(yao)原因的(de)總結(jie)：

　　1. ‌陰性(xing)對(dui)照(zhao)孔(kong)/空(kong)白(bai)孔OD值(zhi)偏高(gao)‌

　　原因‌：

　　血(xue)清標(biao)本中存(cun)在非(fei)特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體(如風(feng)濕(shi)因(yin)子(zi)、異(yi)嗜(shi)性(xing)抗(kang)體)或高(gao)濃度(du)免疫球蛋(dan)白(bai)幹擾‌。

　　標(biao)本溶血、細(xi)菌汙(wu)染(ran)或反復(fu)凍融(rong)導致蛋(dan)白(bai)變(bian)性(xing)‌。

　　洗(xi)滌(di)不(bu)充分(fen)，殘留洗(xi)滌(di)液(ye)或底(di)物(wu)汙(wu)染(ran)‌。

　　2. ‌重(zhong)復(fu)孔間差異(yi)大(da)‌

　　原因‌：

　　加(jia)樣不準(如槍(qiang)頭(tou)插入(ru)液面(mian)過深(shen)或過淺)或移(yi)液器未(wei)校(xiao)準‌。

　　溫育(yu)時(shi)間/溫度(du)不壹致(如未(wei)平(ping)衡至(zhi)室溫或孵育(yu)時(shi)間波動(dong))‌。

　　洗(xi)板(ban)操(cao)作不(bu)規(gui)範(如洗(xi)液(ye)殘留量不均(jun)或洗(xi)板(ban)機(ji)故(gu)障(zhang))‌。

　　3. ‌標(biao)準曲線(xian)線(xian)性(xing)不(bu)佳(jia)‌

　　原因‌：

　　標(biao)準品(pin)配(pei)制錯誤(如濃(nong)度(du)梯(ti)度(du)不準確或稀(xi)釋(shi)不均)‌。

　　酶標(biao)儀(yi)濾(lv)光片汙(wu)染(ran)或波長(chang)設(she)置(zhi)錯誤‌。

　　抗體(ti)/抗原結合(he)效(xiao)率低(di)(如包(bao)被抗體(ti)濃(nong)度不當(dang)或孵育(yu)時(shi)間不足(zu))‌。

　　4. ‌靈敏(min)度低(di)‌

　　原因‌：

　　抗(kang)體或酶標(biao)記物(wu)活性(xing)下(xia)降(如儲存(cun)不(bu)當或過期)‌。

　　顯色(se)反應(ying)時(shi)間不足(zu)或底(di)物(wu)避(bi)光保(bao)存(cun)不(bu)當(dang)‌。

　　樣本稀(xi)釋(shi)過度或抗原濃度(du)過低(di)‌。

　　5. ‌假陽(yang)性(xing)/假(jia)陰性(xing)結(jie)果‌

　　原因‌：

　　實驗(yan)器具汙(wu)染(ran)(如槍(qiang)頭(tou)或微(wei)孔(kong)板交(jiao)叉汙(wu)染(ran))‌。

　　內源性(xing)幹擾(如補(bu)體(ti)、自身(shen)抗體(ti))或外源性(xing)幹擾(如溶血樣(yang)本)‌。

　　終止液(ye)未充分(fen)混勻或汙(wu)染(ran)‌。

　　6. ‌整(zheng)板無(wu)顯色(se)‌

　　原因‌：

　　試(shi)劑(ji)遺(yi)漏(lou)(如未(wei)加(jia)酶或顯色(se)劑)或混淆(xiao)(如不(bu)同(tong)批號試(shi)劑(ji)混(hun)用(yong))‌。

　　酶標(biao)物(wu)失活。

　　洗(xi)板(ban)過度導(dao)致信(xin)號丟(diu)失‌。

　　關鍵(jian)解(jie)決(jue)方(fang)案(an)提示

　　標(biao)準化(hua)操(cao)作‌：嚴格遵循試(shi)劑(ji)說(shuo)明書，控制加(jia)樣(yang)、溫育(yu)、洗(xi)滌(di)等(deng)步(bu)驟(zhou)的(de)壹致性(xing)‌。

　　質控措(cuo)施(shi)‌：定(ding)期校(xiao)準儀(yi)器，使(shi)用(yong)新鮮(xian)試(shi)劑(ji)，避(bi)免樣本反復(fu)凍融(rong)‌。

　　如需進壹步(bu)優化(hua)實驗(yan)流(liu)程(cheng)，可參(can)考(kao)ELISA操(cao)作規(gui)範視頻(pin)‌。

　　註(zhu)：僅供(gong)科(ke)研使用(yong)，以上資料供(gong)參(can)考(kao)，如需具體產(chan)品(pin)說(shuo)明請咨(zi)詢技(ji)術老師(shi)或品(pin)牌(pai)供(gong)應(ying)商(shang)。

　　elisa實驗(yan) 本生(sheng)壹直(zhi)視質量控制為(wei)企業的(de)生(sheng)命(ming)，追求企業競爭力的不斷(duan)提升。公司在經營中始終(zhong)秉承(cheng)：遵(zun)紀(ji)守(shou)法，嚴於律己(ji)，寬仁以待，敢(gan)於承(cheng)擔的企業精神作(zuo)為(wei)標(biao)準，以過硬(ying)的(de)質量和(he)優良(liang)的服務來維(wei)護和拓(tuo)展市(shi)場(chang)，較(jiao)大(da)限(xian)度的滿足(zu)客(ke)戶(hu)的需求。與(yu)客戶(hu)的共贏，是(shi)我(wo)們(men)的(de)發展目標(biao)。本生(sheng)!您信(xin)任(ren)的合(he)作(zuo)夥伴。我(wo)們(men)願(yuan)與(yu)您真誠合(he)作(zuo)，共創美(mei)好的(de)未來(lai)。本生(sheng)試(shi)劑(ji)盒