細(xi)胞培(pei)養(yang)板(ban)：如何判(pan)斷細(xi)胞是(shi)否(fou)貼(tie)壁成功(gong)?

　　使用低(di)吸(xi)附(fu)細(xi)胞培(pei)養(yang)板(ban)時，細(xi)胞貼(tie)壁成功(gong)的判(pan)斷標準與(yu)常(chang)規(gui)培(pei)養(yang)板(ban)不同，需(xu)結(jie)合以(yi)下(xia)方(fang)法(fa)綜合評(ping)估(gu)：

　　1. 顯微(wei)鏡(jing)觀察(cha)法(fa)

　　貼(tie)壁狀態(tai)‌：低(di)吸(xi)附(fu)培(pei)養(yang)板(ban)設(she)計(ji)為(wei)抑(yi)制細(xi)胞貼(tie)壁，若細(xi)胞仍(reng)能貼(tie)壁，說明表(biao)面(mian)處理可能(neng)失效(xiao)或細(xi)胞類(lei)型(xing)特殊。正常情(qing)況應(ying)為(wei)細(xi)胞懸(xuan)浮生(sheng)長(chang)‌。

　　形(xing)態(tai)特征‌：活細(xi)胞應(ying)透(tou)亮有(you)光澤(ze)，死細(xi)胞暗(an)淡無(wu)光(guang)且(qie)膜(mo)碎(sui)裂‌。

　　2. 臺(tai)盼藍(lan)染色法(fa)

　　原(yuan)理(li)‌：活細(xi)胞膜(mo)完整(zheng)，排(pai)斥臺盼藍(lan)(無色);死細(xi)胞膜(mo)通(tong)透(tou)性增加(jia)，被染成藍(lan)色‌。

　　操作‌：染色(se)後(hou)3分鐘(zhong)內(nei)觀察(cha)，超時可能導(dao)致活細(xi)胞誤(wu)染。

　　3. 培(pei)養(yang)液(ye)狀態(tai)

　　清澈(che)度‌：培(pei)養(yang)液(ye)應(ying)清澈(che)，無渾(hun)濁、雜(za)質(zhi)或大量細(xi)胞碎(sui)片(pian)‌。

　　懸(xuan)浮細(xi)胞比(bi)例‌：若為(wei)貼(tie)壁細(xi)胞，應(ying)有少量懸浮細(xi)胞(微(wei)量);若為(wei)懸(xuan)浮細(xi)胞，應(ying)均勻(yun)分散(san)‌。

　　4. 細(xi)胞活性檢測(ce)

　　貼壁分子‌：活細(xi)胞表(biao)面(mian)存在功(gong)能性(xing)黏附(fu)分子(如糖(tang)蛋(dan)白(bai))，死(si)細(xi)胞則(ze)失活或降解‌。

　　註意事(shi)項(xiang)

　　低(di)吸(xi)附(fu)培(pei)養(yang)板(ban)特性‌：專(zhuan)為(wei)懸(xuan)浮細(xi)胞設(she)計(ji)，若細(xi)胞貼(tie)壁，需檢(jian)查培(pei)養(yang)板(ban)是否(fou)適用或處理是否(fou)失(shi)效(xiao)‌。

　　避免(mian)誤(wu)判‌：細(xi)胞膜(mo)邊緣清(qing)晰度非金(jin)標(biao)準(zhun)，應(ying)以(yi)膜完整(zheng)性(xing)為(wei)準(zhun)‌。

　　若需進壹(yi)步確認(ren)，可(ke)結(jie)合臺(tai)盼藍(lan)染色和顯微(wei)鏡(jing)觀察(cha)，確保細(xi)胞活性與(yu)培(pei)養(yang)板(ban)適用性匹(pi)配(pei)。

　　註：供(gong)科(ke)研使用，以(yi)上資(zi)料供(gong)參(can)考(kao)。

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