大鼠(shu)大豆(dou)苷元(Daidzein)ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)說明(ming)書

　　BS-8567大鼠(shu)大豆(dou)苷元(Daidzein)ELISA試(shi)劑盒(he)

　　產(chan)品(pin)概(gai)述(shu)

　　本(ben)試(shi)劑盒(he)采(cai)用(yong)競(jing)爭性酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附(fu)法(fa)(ELISA)，專(zhuan)用(yong)於(yu)定(ding)量檢(jian)測(ce)大鼠(shu)血(xue)漿(jiang)、血(xue)清或組織勻(yun)漿等(deng)生物(wu)樣本(ben)中(zhong)的(de)大豆(dou)苷元(Daidzein)含量。大豆(dou)苷元是(shi)壹種天(tian)然(ran)異(yi)黃(huang)酮(tong)類(lei)化合(he)物(wu)，具有(you)抗(kang)氧(yang)化(hua)、抗(kang)炎(yan)及調節(jie)免(mian)疫(yi)等生物(wu)活性，廣泛(fan)存在(zai)於(yu)豆(dou)科植物(wu)中，其(qi)含(han)量檢(jian)測(ce)對藥(yao)理(li)學(xue)研究(jiu)和(he)營養評(ping)估至關重要。本(ben)試(shi)劑盒(he)基於(yu)抗(kang)原(yuan)-抗體特異(yi)性結(jie)合(he)原(yuan)理，通過酶(mei)標(biao)信(xin)號(hao)放大實現高(gao)靈敏(min)度(du)檢(jian)測(ce)，適用(yong)於(yu)實(shi)驗室常(chang)規分析(xi)。

　　試(shi)劑盒(he)組成(cheng)

　　預(yu)包被(bei)微孔(kong)板(ban)：96孔(kong)(12條×8孔)，板(ban)條可拆卸(xie)，包被(bei)有(you)大豆(dou)苷元特異(yi)性抗體。

　　標準(zhun)品(pin)：6個濃(nong)度(du)梯度(du)(0.13–61.02 ng/mL)，凍幹(gan)粉(fen)狀，臨(lin)用(yong)前(qian)用(yong)標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液(ye)復溶。

　　酶(mei)標(biao)記(ji)物(wu)：辣(la)根(gen)過氧化(hua)物(wu)酶(mei)(HRP)標(biao)記(ji)的(de)競(jing)爭抗(kang)原(yuan)，棕色(se)避(bi)光(guang)保存。

　　顯(xian)色(se)底物(wu)：TMB(四甲基聯(lian)苯(ben)胺)溶(rong)液(ye)，無(wu)色(se)透明(ming)液(ye)體。

　　終止(zhi)液(ye)：2M硫酸溶(rong)液(ye)，用(yong)於(yu)終(zhong)止(zhi)反(fan)應。

　　洗滌液(ye)：20×濃(nong)縮緩沖液(ye)，需(xu)用(yong)去(qu)離(li)子(zi)水稀釋(shi)後使(shi)用(yong)。

　　樣本(ben)稀釋(shi)液(ye)：用(yong)於(yu)調(tiao)節(jie)樣本(ben)濃(nong)度(du)至檢(jian)測(ce)範(fan)圍(wei)。

　　封板(ban)膜：2張(zhang)，用(yong)於(yu)微(wei)孔板(ban)密(mi)封(feng)。

　　說(shuo)明(ming)書：1份。

　　儲存條件

　　未開封(feng)試(shi)劑盒(he)：2–8°C避光(guang)保存，有(you)效(xiao)期(qi)12個月(yue)。

　　開封(feng)後：標(biao)準(zhun)品(pin)、酶(mei)標(biao)記(ji)物(wu)及顯(xian)色(se)底物(wu)需(xu)分(fen)裝(zhuang)凍存(-20°C)，避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong);微(wei)孔(kong)板(ban)幹(gan)燥(zao)密(mi)封(feng)保存。

　　禁(jin)止(zhi)凍結(jie)濃(nong)縮洗滌液(ye)，防(fang)止(zhi)結(jie)晶(jing)析(xi)出。

　　樣本(ben)處(chu)理

　　血(xue)漿/血清樣本(ben)：采(cai)集(ji)後立即(ji)離(li)心(xin)(3000 rpm，10分(fen)鐘(zhong))，取(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，-80°C保存。避(bi)免(mian)溶血(xue)。

　　組織勻(yun)漿：稱取組織，加入生理鹽(yan)水(shui)(1:9 w/v)勻(yun)漿，離(li)心(xin)取(qu)上清液(ye)。

　　註意事(shi)項(xiang)：樣本(ben)中(zhong)大豆(dou)苷元可能以(yi)結(jie)合(he)態存在(zai)，建(jian)議(yi)使(shi)用(yong)β-葡萄糖(tang)醛(quan)酸酶(mei)水(shui)解以提高(gao)檢(jian)測(ce)靈敏(min)度(du)。樣本(ben)渾(hun)濁時需(xu)離(li)心(xin)(5000 rpm，10分(fen)鐘(zhong))或(huo)過濾(0.22 μm膜)。

　　實驗步驟(zhou)

　　1. 試(shi)劑準(zhun)備(bei)

　　洗滌液(ye)：用(yong)去(qu)離(li)子(zi)水將20×濃(nong)縮液(ye)稀釋(shi)至(zhi)1×(如(ru)10 mL濃(nong)縮液(ye)+190 mL水(shui))。

　　標(biao)準(zhun)品(pin)梯度(du)：用(yong)標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液(ye)將凍幹(gan)標(biao)準品(pin)復溶，梯度(du)稀釋(shi)至(zhi)0.13、0.39、1.17、3.51、10.53、61.02 ng/mL。

　　樣本(ben)稀釋(shi)：用(yong)樣本(ben)稀釋(shi)液(ye)將待測(ce)樣本(ben)稀釋(shi)至(zhi)檢(jian)測(ce)範(fan)圍(wei)內(nei)(建(jian)議(yi)預(yu)實驗確(que)定(ding)稀釋(shi)倍數)。

　　2. 加樣與(yu)孵(fu)育(yu)

　　每孔加入100 μL標(biao)準(zhun)品(pin)或(huo)樣本(ben)(設(she)空(kong)白(bai)孔(kong)僅(jin)加樣本(ben)稀釋(shi)液(ye))。

　　每孔加入50 μL酶(mei)標(biao)記(ji)物(wu)，輕搖(yao)混(hun)勻(yun)。

　　37°C避光(guang)孵(fu)育(yu)60分(fen)鐘(zhong)。

　　3. 洗滌

　　棄去(qu)孔(kong)內(nei)液(ye)體，每孔加入350 μL洗滌液(ye)，靜(jing)置(zhi)30秒後甩(shuai)幹(gan)，重復5次，拍幹(gan)。

　　4. 顯(xian)色(se)與(yu)終止(zhi)

　　每孔加入100 μL顯(xian)色(se)底物(wu)，37°C避光(guang)孵(fu)育(yu)15分(fen)鐘(zhong)。

　　每孔加入100 μL終(zhong)止(zhi)液(ye)，輕搖(yao)混(hun)勻(yun)。

　　5. 測(ce)定

　　立即(ji)用(yong)酶(mei)標(biao)儀在(zai)450 nm波長下(xia)測(ce)定吸光(guang)度(OD值)，參(can)考(kao)波長630 nm。

　　結(jie)果(guo)計(ji)算(suan)

　　標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)繪(hui)制：以標(biao)準品(pin)濃(nong)度(du)(ng/mL)為橫(heng)坐標，OD值為縱(zong)坐(zuo)標，擬(ni)合(he)四參(can)數邏輯曲(qu)線(xian)(推薦使(shi)用(yong)專(zhuan)業(ye)軟(ruan)件(jian))。

　　樣本(ben)濃(nong)度(du)計(ji)算(suan)：根(gen)據樣本(ben)OD值代(dai)入標(biao)準曲(qu)線(xian)方(fang)程(cheng)，乘以(yi)稀釋(shi)倍數得到實(shi)際濃(nong)度(du)。

　　性能參(can)數

　　靈敏(min)度(du)：檢(jian)測(ce)限0.13 ng/mL。

　　精密(mi)度(du)：板(ban)內(nei)變異(yi)系數(CV)<10%，板(ban)間(jian)CV<15%。

　　回收率：80–120%(驗證方(fang)法：加標回收實驗)。

　　線(xian)性範(fan)圍(wei)：0.13–61.02 ng/mL，相(xiang)關系數r²≥0.98。

　　特異(yi)性：與類(lei)似結(jie)構化(hua)合(he)物(wu)(如(ru)染料(liao)木素)交(jiao)叉反(fan)應率(lv)<5%。

　　註意事(shi)項(xiang)

　　操(cao)作(zuo)規範(fan)：避(bi)免(mian)酶(mei)標(biao)記(ji)物(wu)和(he)顯(xian)色(se)底物(wu)接觸金屬(shu)離(li)子(zi);顯(xian)色(se)後30分(fen)鐘(zhong)內(nei)測(ce)定，防(fang)止(zhi)信號(hao)衰(shuai)減。

　　質量控制：每批(pi)次實(shi)驗需(xu)包(bao)含(han)標(biao)準曲(qu)線(xian)和(he)質控樣本(ben)(推薦高(gao)、中、低濃(nong)度(du))。

　　安(an)全(quan)防(fang)護(hu)：終止(zhi)液(ye)含(han)強酸，需(xu)佩戴(dai)手(shou)套(tao)和(he)護(hu)目鏡操(cao)作(zuo)。

　　廢物(wu)處理(li)：含(han)酶(mei)廢物(wu)需(xu)經(jing)滅活處理後再(zai)丟棄。

　　常見問(wen)題解答(da)

　　信(xin)號(hao)偏低：檢(jian)查(zha)孵(fu)育(yu)時(shi)間(jian)或溫(wen)度是(shi)否不足(zu);確(que)認(ren)洗滌步驟(zhou)是(shi)否充分。

　　高(gao)背(bei)景(jing)值：可能因(yin)洗滌不凈(jing)或樣本(ben)基(ji)質幹(gan)擾，建(jian)議(yi)增加洗滌次數或優(you)化樣本(ben)前(qian)處理(li)。

　　標準曲(qu)線(xian)異(yi)常(chang)：復溶標準(zhun)品(pin)時(shi)需(xu)充分混(hun)勻(yun)，避免(mian)氣泡(pao)影(ying)響濃(nong)度(du)準確(que)性。

　　註：本產(chan)品(pin)僅(jin)供科研使(shi)用(yong)，不(bu)作(zuo)為實(shi)驗依據。具體操(cao)作(zuo)請以實(shi)際試(shi)劑盒(he)說明(ming)書為準(zhun)。

　　大鼠(shu)大豆(dou)苷元(Daidzein)ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 本生壹直(zhi)視質量控制為企業(ye)的(de)生命，追(zhui)求(qiu)企業(ye)競(jing)爭力(li)的(de)不斷(duan)提升(sheng)。公(gong)司(si)在(zai)經(jing)營中始終(zhong)秉(bing)承(cheng)：遵(zun)紀(ji)守法，嚴(yan)於(yu)律己，寬仁(ren)以待，敢於(yu)承(cheng)擔(dan)的(de)企業(ye)精神(shen)作(zuo)為標(biao)準(zhun)，以過硬的(de)質量和(he)優(you)良(liang)的(de)服務(wu)來維(wei)護(hu)和(he)拓展(zhan)市(shi)場，較大限度的(de)滿足(zu)客戶(hu)的(de)需(xu)求(qiu)。與(yu)客(ke)戶(hu)的(de)共贏(ying)，是(shi)我(wo)們的(de)發展(zhan)目標。本生!您信(xin)任(ren)的(de)合(he)作(zuo)夥伴。我(wo)們願(yuan)與(yu)您(nin)真(zhen)誠合(he)作(zuo)，共創美好(hao)的(de)未來。 本(ben)生試(shi)劑盒(he)