植(zhi)物(wu)達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)(DS)酶(mei)聯免(mian)疫分(fen)析(xi)試劑(ji)盒本試(shi)劑(ji)盒僅供(gong)研(yan)究使用(yong)。

檢(jian)測範(fan)圍(wei)：                                                             96T

4.5 U/L -180 U/L

使用(yong)目的(de)：

本(ben)試(shi)劑(ji)盒用(yong)於測(ce)定(ding)植物(wu)組織(zhi)，細胞上清(qing)及(ji)相(xiang)關(guan)液(ye)體(ti)樣本中達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)（DS）的(de)活性。

　　BS-258251-A  植(zhi)物(wu)達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)(DS)ELISA檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒 96T

　　BS-258251-B  植物(wu)達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)(DS)ELISA檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒 48T

實(shi)驗原(yuan)理(li)

本(ben)試(shi)劑(ji)盒應用(yong)雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾心(xin)法(fa)測定(ding)標(biao)本(ben)中植(zhi)物(wu)達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)（DS）水(shui)平(ping)。用(yong)純(chun)化(hua)的(de)植(zhi)物(wu)達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)（DS）抗(kang)體(ti)包(bao)被(bei)微(wei)孔(kong)板(ban)，制成固相(xiang)抗(kang)體(ti)，往(wang)包(bao)被(bei)單抗(kang)的(de)微(wei)孔(kong)中依(yi)次加(jia)入達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)（DS），再(zai)與(yu)HRP標(biao)記(ji)的(de)達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)（DS）抗(kang)體(ti)結合，形成抗(kang)體(ti)-抗(kang)原(yuan)-酶(mei)標(biao)抗(kang)體(ti)復(fu)合物(wu)，經(jing)過(guo)洗滌後(hou)加(jia)底(di)物TMB顯(xian)色(se)。TMB在HRP酶(mei)的(de)催化(hua)下轉(zhuan)化(hua)成藍(lan)色(se)，並在酸(suan)的(de)作用(yong)下轉(zhuan)化(hua)成最終(zhong)的(de)黃色(se)。顏色(se)的(de)深淺和(he)樣品中的(de)達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)（DS）呈(cheng)正相(xiang)關(guan)。用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)在450nm波(bo)長下測(ce)定(ding)吸(xi)光度(du)（OD值(zhi)），通過(guo)標(biao)準曲線計(ji)算樣品中植物(wu)達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)（DS）活性濃(nong)度(du)。

試(shi)劑(ji)盒組成

標(biao)本(ben)要求(qiu) 

1．標(biao)本(ben)采集(ji)後(hou)盡早進(jin)行提(ti)取，提(ti)取按(an)相(xiang)關(guan)文獻(xian)進(jin)行，提(ti)取後(hou)應(ying)盡快(kuai)進(jin)行實(shi)驗。若不能(neng)馬上(shang)進(jin)行試(shi)驗，可(ke)將標(biao)本(ben)放於-20℃保(bao)存，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反復(fu)凍融

2．不能(neng)檢(jian)測含(han)NaN3的(de)樣品，因(yin)NaN3抑制辣(la)根過(guo)氧化(hua)物酶(mei)的(de)（HRP）活性。

操(cao)作步驟(zhou)

1. 標(biao)準品的(de)稀釋：本(ben)試(shi)劑(ji)盒提供(gong)原(yuan)倍標(biao)準品壹支，用(yong)戶(hu)可按(an)照(zhao)下(xia)列(lie)圖(tu)表在小(xiao)試(shi)管(guan)中進(jin)行稀(xi)釋。

2. 加(jia)樣：分(fen)別(bie)設(she)空(kong)白孔(kong)（空(kong)白(bai)對照(zhao)孔(kong)不加(jia)樣品及酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)，其(qi)余各步操作相(xiang)同(tong)）、標(biao)準孔(kong)、待測(ce)樣品孔(kong)。在酶(mei)標(biao)包(bao)被(bei)板(ban)上(shang)標(biao)準品準確加(jia)樣50μl，待測(ce)樣品孔(kong)中先(xian)加(jia)樣品稀釋液(ye)40μl，然(ran)後(hou)再(zai)加(jia)待測(ce)樣品10μl（樣品最終(zhong)稀釋度(du)為5倍(bei)）。加(jia)樣將樣品加(jia)於酶(mei)標(biao)板(ban)孔(kong)底(di)部，盡量(liang)不觸及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混(hun)勻(yun)。

3. 溫(wen)育(yu)：用(yong)封板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。   

4. 配(pei)液(ye)：將30倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye)用(yong)蒸餾(liu)水30倍(bei)稀(xi)釋後(hou)備(bei)用(yong)

5. 洗(xi)滌：小(xiao)心(xin)揭(jie)掉封(feng)板(ban)膜(mo)，棄(qi)去液(ye)體(ti)，甩(shuai)幹，每孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液(ye)，靜(jing)置(zhi)30秒(miao)後(hou)棄(qi)去，如此重復(fu)5次(ci)，拍(pai)幹。

6. 加(jia)酶(mei)：每孔(kong)加(jia)入酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。

7. 溫(wen)育(yu)：操(cao)作同3。

8. 洗(xi)滌：操(cao)作同5。

9. 顯(xian)色(se)：每孔(kong)先(xian)加(jia)入顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl，再(zai)加(jia)入顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃避(bi)光(guang)顯(xian)色(se)10分(fen)鐘(zhong).

10. 終(zhong)止：每孔(kong)加(jia)終(zhong)止液(ye)50μl，終(zhong)止反應（此時(shi)藍(lan)色(se)立(li)轉(zhuan)黃色(se)）。

11. 測(ce)定(ding)：以(yi)空白(bai)孔(kong)調(tiao)零(ling)，450nm波(bo)長依(yi)序測(ce)量(liang)各孔(kong)的(de)吸(xi)光度(du)（OD值(zhi)）。 測(ce)定(ding)應在加(jia)終(zhong)止液(ye)後(hou)15分(fen)鐘(zhong)以(yi)內進(jin)行。

植(zhi)物(wu)達瑪烷(wan)二醇(chun)合酶(mei)(DS)酶(mei)聯免(mian)疫分(fen)析(xi)試劑(ji)盒操作程序(xu)總(zong)結：

計(ji)算

  以(yi)標(biao)準物的(de)濃度(du)為橫(heng)坐(zuo)標(biao)，OD值(zhi)為(wei)縱坐(zuo)標(biao)，在坐(zuo)標(biao)紙上(shang)繪出(chu)標(biao)準曲線，根據(ju)樣品的(de)OD值(zhi)由(you)標(biao)準曲線查出(chu)相(xiang)應(ying)的(de)濃度(du)；再乘以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數(shu)；或(huo)用(yong)標(biao)準物的(de)濃度(du)與(yu)OD值(zhi)計(ji)算出(chu)標(biao)準曲線的(de)直線回(hui)歸方(fang)程式，將樣品的(de)OD值(zhi)代(dai)入方(fang)程式，計(ji)算出(chu)樣品濃度(du)，再乘以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數(shu)，即為(wei)樣品的(de)實(shi)際(ji)濃度(du)。

註意事項

1．試(shi)劑(ji)盒從冷(leng)藏(zang)環(huan)境(jing)中取出(chu)應(ying)在室(shi)溫平(ping)衡(heng)15-30分(fen)鐘(zhong)後方(fang)可使用(yong)，酶(mei)標(biao)包(bao)被(bei)板(ban)開封(feng)後(hou)如未用(yong)完，板(ban)條(tiao)應(ying)裝入密封袋中保存。

2．濃(nong)洗(xi)滌液(ye)可(ke)能(neng)會有(you)結晶析(xi)出(chu)，稀(xi)釋時(shi)可(ke)在水(shui)浴中加(jia)溫(wen)助(zhu)溶，洗(xi)滌時(shi)不影響結果。

3．各(ge)步(bu)加(jia)樣均應使用(yong)加(jia)樣器(qi)，並(bing)經(jing)常校(xiao)對其(qi)準確性，以(yi)避免(mian)試驗誤(wu)差(cha)。壹次加(jia)樣時間(jian)最好控(kong)制在5分(fen)鐘(zhong)內，如標(biao)本(ben)數量(liang)多(duo)，推薦使用(yong)排槍(qiang)加(jia)樣。

4． 請(qing)每次測(ce)定(ding)的(de)同時做標(biao)準曲線，最好做(zuo)復(fu)孔(kong)。如(ru)標(biao)本(ben)中待測(ce)物質含(han)量(liang)過(guo)高(gao)（樣本OD值(zhi)大(da)於標(biao)準品孔(kong)第(di)壹孔(kong)的(de)OD值(zhi)），請(qing)先(xian)用(yong)樣品稀釋液(ye)稀(xi)釋壹定(ding)倍數(shu)（n倍(bei)）後(hou)再(zai)測定(ding)，計(ji)算時請(qing)最後乘以(yi)總(zong)稀(xi)釋倍(bei)數(shu)（×n×5）。

5． 封(feng)板(ban)膜(mo)只限壹次性使用(yong)，以(yi)避免(mian)交(jiao)叉汙(wu)染。

6．底(di)物請(qing)避光保存。

7．嚴格按(an)照(zhao)說(shuo)明書的(de)操作進(jin)行，試(shi)驗結果判定(ding)必(bi)須以(yi)酶(mei)標(biao)儀(yi)讀(du)數(shu)為準.

8．所有(you)樣品，洗滌液(ye)和(he)各(ge)種(zhong)廢(fei)棄(qi)物都(dou)應(ying)按(an)傳(chuan)染物(wu)處理(li)。

9．本(ben)試(shi)劑(ji)不同批(pi)號(hao)組分(fen)不得混(hun)用(yong)。

保(bao)存條(tiao)件及有(you)效期(qi)

1．試(shi)劑(ji)盒保存：；2-8℃。

2．有(you)效期(qi)：6個月