植(zhi)物(wu)海(hai)藻糖(tang)-6-磷酸(T6P)ELISA試(shi)劑盒(he)使用說明書(shu)

　　BS-8050-A 植(zhi)物(wu)海(hai)藻糖(tang)-6-磷酸(T6P)ELISA 試(shi)劑盒(he) 96T

　　BS-8050-B 植(zhi)物(wu)海(hai)藻糖(tang)-6-磷酸(T6P)ELISA 試(shi)劑盒(he) 48T

　　壹、實驗原(yuan)理

　　本試(shi)劑盒(he)采用雙抗體(ti)夾心法酶(mei)聯(lian)免疫(yi)吸(xi)附(fu)試(shi)驗(ELISA)檢(jian)測植(zhi)物(wu)組(zu)織(zhi)或細胞(bao)中(zhong)的T6P水平(ping)。微(wei)孔板預(yu)包(bao)抗(kang)T6P抗體(ti)，樣(yang)本中(zhong)T6P與(yu)固相抗體(ti)結(jie)合(he)後，加入(ru)辣(la)根過(guo)氧化(hua)物酶(mei)(HRP)標記(ji)的二(er)抗形成(cheng)復(fu)合(he)物(wu)。加入(ru)底物TMB顯色，TMB在HRP催(cui)化(hua)下(xia)轉化(hua)為藍色，酸終(zhong)止後顯黃色，顯色深(shen)度(du)與(yu)樣本中(zhong)T6P濃(nong)度(du)呈正(zheng)相關，於450nm波長(chang)測定吸(xi)光(guang)度(du)計算(suan)濃(nong)度(du)‌。

　　二(er)、試劑盒(he)組(zu)成(cheng)

　　組(zu)分 規(gui)格(ge) 保(bao)存(cun)條(tiao)件(jian)

　　預(yu)包(bao)被(bei)微孔板 12孔×8條 2-8℃密封幹燥

　　標準品(pin) 凍(dong)幹(gan)粉(fen) -20℃復溶(rong)後分裝

　　HRP標(biao)記檢(jian)測抗體(ti) 液體(ti) 避(bi)光(guang)2-8℃

　　顯色底物(TMB) A液+B液 現(xian)用(yong)現配，避光(guang)

　　終(zhong)止液 2M硫(liu)酸(suan) 室溫

　　濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液 液體(ti) 40℃水浴(yu)溶(rong)解結(jie)晶

　　樣(yang)本xishi液 液體(ti) 含(han)穩(wen)定劑

　　註(zhu)‌：不(bu)同(tong)品(pin)牌組(zu)分可(ke)能存(cun)在(zai)差(cha)異，詳(xiang)見具(ju)體(ti)說(shuo)明書(shu)。

　　三(san)、樣(yang)本處(chu)理

　　1. 樣本類(lei)型(xing)

　　植(zhi)物(wu)組(zu)織(zhi)‌：稱取0.1g組(zu)織(zhi)，加入(ru)1mL提(ti)取液冰(bing)浴(yu)勻漿(jiang)，離心取上(shang)清(qing)。

　　細胞(bao)/細菌‌：收集離心後棄(qi)上(shang)清(qing)，超聲(sheng)破(po)碎細胞(bao)提取上(shang)清(qing)。

　　2. 保(bao)存(cun)條(tiao)件(jian)

　　短期(qi)‌：2-8℃保(bao)存(cun)≤48小(xiao)時(shi)。

　　長(chang)期(qi)‌：分裝後-20℃凍(dong)存(cun)，避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

　　3. 稀釋建議

　　常規(gui)樣本‌：推薦稀釋5-20倍(如(ru)取20μL樣(yang)本+180μL稀釋液)。

　　高濃(nong)度(du)樣本‌：需預(yu)實(shi)驗確定稀釋倍數(shu)，最高稀釋100000倍(三(san)步(bu)稀釋法)。

　　四(si)、操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)

　　標準品(pin)配制‌

　　凍(dong)幹(gan)標(biao)準品(pin)加1mL稀釋液復(fu)溶(rong)，混勻(yun)後靜(jing)置10分鐘(zhong)。

　　進行系列(lie)稀釋(如8pmol/L→4pmol/L→…→0.5pmol/L)。

　　加樣(yang)‌

　　標(biao)準孔：50μL/孔。

　　樣本孔：先加40μL稀釋液，再(zai)加10μL樣(yang)本(總(zong)稀釋5倍)。

　　空(kong)白(bai)孔：不(bu)加樣(yang)本及(ji)二(er)抗。

　　孵(fu)育‌

　　37℃孵(fu)育120分鐘(zhong)，洗(xi)板3次(ci)(每次(ci)浸泡(pao)1分鐘(zhong))。

　　顯色與(yu)終(zhong)止‌

　　每孔加TMB顯色液100μL，37℃避(bi)光(guang)孵育15分鐘(zhong)。

　　加終(zhong)止液50μL終(zhong)止反(fan)應(ying)，30分鐘(zhong)內測OD值。

　　五(wu)、註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)

　　樣本避(bi)免‌：含(han)疊氮(dan)鈉(NaN3)樣(yang)本(抑(yi)制HRP活性(xing))‌。

　　試(shi)劑平衡‌：使用(yong)前(qian)室溫平(ping)衡(heng)20分鐘(zhong)，濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液需40℃水浴(yu)溶(rong)解結(jie)晶。

　　質(zhi)量控(kong)制‌：建議設置(zhi)復孔，標準曲線R²應≥0.95。

　　六、結(jie)果分析(xi)

　　標準曲線‌：以OD值對濃(nong)度(du)繪制四參數(shu)方程(cheng)。

　　濃(nong)度(du)計算(suan)‌：樣(yang)本OD值(zhi)代入(ru)曲線方程(cheng)，再(zai)乘(cheng)以(yi)稀釋倍數(shu)。

　　註(zhu)：以(yi)上(shang)僅(jin)供參考，不(bu)作(zuo)為實際(ji)數(shu)據，實(shi)驗需嚴格(ge)遵(zun)循(xun)說(shuo)明或(huo)咨詢(xun)技術(shu)老(lao)師(shi)。

　　植(zhi)物(wu)海(hai)藻糖(tang)-6-磷酸(T6P)ELISA試(shi)劑盒(he) 天津本生(sheng)壹(yi)直視質量控(kong)制為企(qi)業的生(sheng)命，追(zhui)求(qiu)企(qi)業競爭(zheng)力(li)的不(bu)斷提升(sheng)。公(gong)司在(zai)經(jing)營(ying)中(zhong)始(shi)終(zhong)秉承(cheng)：遵(zun)紀守法(fa)，嚴(yan)於律(lv)己，寬(kuan)仁(ren)以待(dai)，敢於承(cheng)擔的企(qi)業精神(shen)作(zuo)為標準，以(yi)過(guo)硬(ying)的質(zhi)量和優良(liang)的(de)服務(wu)來維(wei)護和拓展(zhan)市場(chang)，較大限(xian)度(du)的滿足(zu)客戶的需求。與(yu)客戶的共(gong)贏(ying)，是(shi)我們(men)的(de)發展(zhan)目標，本生(sheng)，您(nin)信任(ren)的(de)合(he)作(zuo)夥(huo)伴!本生(sheng)試(shi)劑盒(he)