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您(nin)現在的位置(zhi):首頁(ye) > 技術(shu)文(wen)章 > 高通(tong)量(liang)的96孔PCR板和(he)8聯管(guan)的使(shi)用和選擇註(zhu)意事(shi)項
高通(tong)量(liang)的96孔PCR板和(he)8聯管(guan)是(shi)在(zai)聚合(he)酶(mei)鏈式(shi)反(fan)應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中(zhong),主(zhu)要作(zuo)為(wei)參(can)與(yu)擴(kuo)增反(fan)應的引(yin)物、Taq DNA聚合(he)酶(mei)、dNTP、模板(ban)核(he)酸、Mg、緩(huan)沖液(ye)等的承載(zai)物(wu)。醫療級(ji)聚丙烯(xi)(PP)材(cai)質因其(qi)的純凈度和穩(wen)定性,能更(geng)好適(shi)應PCR反(fan)應過程(cheng)中(zhong)反(fan)復高低(di)溫設(she)定,並(bing)且(qie)能夠(gou)實(shi)現高溫高壓(ya)滅(mie)菌(jun)操作(zuo),常(chang)常(chang)被用(yong)於PCR耗(hao)材(cai)的生(sheng)產。隨(sui)著熒(ying)光定量(liang)PCR技術(shu)的普(pu)及,該技術(shu)被廣(guang)泛(fan)用(yong)於遺(yi)傳(chuan)、生(sheng)化(hua)、免(mian)疫、醫藥等領(ling)域,不僅應用於基因(yin)分(fen)離、克隆和核(he)酸序(xu)列(lie)分(fen)析(xi)等(deng)基(ji)礎(chu)研究(jiu),還(hai)可用(yong)於疾病的(de)診斷或(huo)任何有DNA,RNA的(de)研究(jiu)領(ling)域。
如何(he)正(zheng)確(que)使用(yong)96孔(kong)PCR孔(kong)板

PCR板有透(tou)明和(he)乳白色可選,其中(zhong)乳白(bai)色更(geng)適(shi)合(he)用於頂部采(cai)集熒(ying)光信(xin)號的(de)新(xin)型熒光定量(liang)PCR儀(如伯樂(le)CFX系(xi)列(lie),ABI 7500fast 以(yi)上型號, Roche 480系(xi)列(lie)),但(dan)如(ru)果(guo)熒(ying)光定量(liang)PCR儀是(shi)底部光源(yuan)的(de),則應選擇透(tou)明的(de)。
PCR板(ban)根據裙(qun)邊設(she)計又(you)可分(fen)為(wei)無(wu)裙(qun)邊(bian)、半(ban)裙邊(bian)和(he)全裙邊(bian)三(san)種設(she)計模(mo)式(shi),不同廠家的(de)熒(ying)光定量(liang)PCR儀會(hui)設(she)計不同的(de)切(qie)角(jiao)或邊(bian)緣(yuan)凸起(qi),請(qing)選擇適(shi)合(he)該PCR儀(yi)的板(ban)子(zi)。
PCR板(ban)又(you)分(fen)100ul體積(矮板(ban))和(he)200ul體(ti)積(高板(ban)),根據機型的不同選擇,選擇不同高度孔板(ban),避免(mian)高度錯誤對機器造成破(po)壞和加熱不均(jun)導致數(shu)據失(shi)真(zhen)。
當(dang)使用96孔板做(zuo)熒(ying)光定量(liang)PCR實驗的時(shi)候(hou),推薦(jian)使(shi)用光學(xue)膜(mo)代(dai)來密封反(fan)應孔。
加樣(yang)後(hou)會(hui)在(zai)管(guan)壁(bi)上飛(fei)濺壹些(xie)小液(ye)滴,另(ling)外(wai)反(fan)應體系(xi)內(nei)也(ye)會(hui)有壹些(xie)氣(qi)泡(pao),需(xu)要(yao)離心去掉掛壁(bi)液(ye)滴和氣(qi)泡(pao)。請(qing)使用專(zhuan)用(yong)的(de)微孔板(ban)離心機解決(jue)上述(shu)問題。
PCR板(ban)屬(shu)於壹次(ci)性消(xiao)耗(hao)品,生(sheng)產壹次(ci)成型,不建議(yi)剪(jian)開使(shi)用(yong)容(rong)易造成實驗誤差增(zeng)加,不能清洗(xi)或部分重(zhong)復(fu)利(li)用。不要為(wei)了(le)節省壹點小錢(qian),而(er)給實(shi)驗(yan)帶來後續分(fen)析上的困擾(rao)。樣(yang)本(ben)量(liang)少,用(yong)8聯管(guan)做實(shi)驗又(you)該(gai)註意哪(na)些(xie)呢(ne)?

8聯管(guan)也分(fen)乳白和透明兩種,選擇方(fang)式(shi)和(he)孔(kong)板(ban)壹樣(yang),根據PCR儀(yi)的熒(ying)光信(xin)號采(cai)集方(fang)式(shi)決(jue)定。
8聯管(guan)同樣(yang)也(ye)有0.1ml(矮(ai)管(guan))和0.2ml(高管(guan)),根據PCR儀(yi)的加熱模塊(kuai)體積確(que)定。
8聯管(guan)的蓋子(zi)壹般(ban)有光學(xue)平(ping)蓋和凸型圓(yuan)蓋之分(fen),光學(xue)平(ping)蓋適(shi)用(yong)於熒光定量(liang)PCR,圓(yuan)蓋適(shi)用(yong)於普通(tong)PCR。

使(shi)用單管(guan)或8聯管(guan)做實(shi)驗,並且樣(yang)本(ben)數量(liang)不多(duo)的(de)時(shi)候(hou),建議在樣(yang)品加熱塊(kuai)(TRAY)上對稱(cheng)地安(an)放(fang)樣(yang)品,最(zui)好是(shi)縱(zong)向放(fang)置(zhi),並且(qie)優先放(fang)在第6列(lie)或(huo)第7列(lie),然後逐(zhu)漸(jian)向兩邊放(fang)置(zhi)。這(zhe)樣(yang)做(zuo)的好處是(shi)熱蓋壓(ya)下(xia)來的時(shi)候(hou)不至於發生(sheng)傾(qing)斜,各(ge)個反(fan)應管(guan)的受(shou)力(li)和(he)受(shou)熱都比(bi)較均(jun)勻,提高孔(kong)與(yu)孔之(zhi)間(jian)的(de)數(shu)據精(jing)密性。也可以(yi)在(zai)加熱模塊(kuai)四角(jiao)的位(wei)置(zhi),放(fang)置(zhi)4個單(dan)管(guan)平(ping)衡熱蓋壓(ya)力(li),避(bi)免(mian)擴(kuo)增少量(liang)樣(yang)本(ben)時(shi)出(chu)現管(guan)子(zi)變(bian)形(xing)的(de)情(qing)況。
管(guan)蓋沒有蓋好造成PCR反(fan)應液(ye)熱蒸發,影響(xiang)反(fan)應溫度的準確控制及反(fan)應也各(ge)成份的濃度,同時(shi)也(ye)成為(wei)壹個汙(wu)染源(yuan)。不但會(hui)因(yin)壓(ya)蓋時(shi)由於粗心或者用力(li)不均(jun)致使(shi)部分蓋子(zi)變(bian)形(xing),而(er)且(qie)還(hai)會(hui)造成樣(yang)品的(de)交叉汙(wu)染,所以(yi)我(wo)們推薦(jian)用(yong)獨立管(guan)蓋的8聯管(guan),每管(guan)蓋壹體(ti),確(que)保(bao)樣(yang)本(ben)獨立反(fan)應,避免(mian)交叉汙(wu)染。
熒(ying)光定量(liang)PCR耗(hao)材(cai) 本(ben)生(sheng)是(shi)實(shi)驗室本(ben)生(sheng)壹直(zhi)視質量(liang)控制為(wei)企業的(de)生(sheng)命,追(zhui)求企業競(jing)爭(zheng)力(li)的(de)不斷提升。公(gong)司在(zai)經(jing)營中(zhong)始(shi)終秉(bing)承(cheng):遵(zun)紀守法,嚴(yan)於律(lv)己(ji),寬(kuan)仁以(yi)待,敢於承擔(dan)的企業精(jing)神(shen)作(zuo)為(wei)標(biao)準,以過(guo)硬(ying)的質量(liang)和優良的(de)服(fu)務(wu)來維護(hu)和拓展市(shi)場(chang),較大(da)限度的滿足(zu)客(ke)戶(hu)的需(xu)求。與(yu)客(ke)戶(hu)的共(gong)贏,是(shi)我(wo)們的(de)發(fa)展目(mu)標(biao)。本(ben)生(sheng)!您(nin)信(xin)任的合(he)作(zuo)夥伴(ban)。我(wo)們願(yuan)與(yu)您(nin)真(zhen)誠(cheng)合(he)作(zuo),共(gong)創美好的未來。
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